BL21(DE3)的故事!!

華文生技網 Dr.郭書祥 wrote

E.coli BL21 是1986年發表的 (Studier, F.W. et al (1986) J. Mol. Biol., 189, 113.)，因 為它的兩個蛋白分解酵素基 因 lon 及 ompT 己經被人工變異而破壞，因此適合作為外來蛋白質表現的E.coli host。

在1990 年 Novagen公司首先將BL21這個菌株商品化，後來更推出能夠用T7-promotor啟動表現的 lamda-DE3 lysogen，它被稱 為BL21(DE3). 此外公司推出一些可用E.coli promotor 就可以啟動表現的 non-lamda-DE3 lysogen。

但 是，BL21雖然適合作為外來蛋白質表現的host，但是它並不是 recA-，因此常常會有質體DNA monomer因為DNA 序列含過多 repetitive sequence ，再加上遺傳背景有recombinase A 活性而成為 polymer 或改變結構的現象。

後 來，為了增加 質體DNA monomer 的比例，以及安定質體DNA並減少recombination， BL21 又被修改成 recA-菌株，這 時它的代號是 "BLR" ，可是我看很多人都不知道這件事，可能是弄protein expression的人對E.coli 分子遺傳不太留意，祗重 視protein expression的level，而沒有想到或注意到 plasmid structure根本結構可能己經產生變化。此外，若 protein expression的產物會造成DE3 prophage 消失，那麼採用BLR也可能會有幫助。

Novagen公司 產品品牌後來被德國 Merck 公司負責北美業務的子公司EMD Biosciences併購，由其行銷各種Novagen品牌分子生物學產品，在 BLR方面主要產品有 BLR, BLR(DE3), BLR(DE3)pLysS三種E.coli Host Competent Cell
(http://www.emdbiosciences.com/Products/BrowseProductsByCategory.asp?catid=1197)

DH5 和 JM109 都 是recA-菌株，都是常見E.coli Host ，很少有怪事發生，這算"正常"。不過，BL21竟然也被用了快20年，到現在還是最常用的 E.coli 標準protein expression host , 不知道大家實驗結果都是怎麼作出來的

http://www.bioweb.com.tw/forcontent2.asp?chTITLE=%A9%E2%BD%E8%C5%E9%A4%E8%AD%B1%AA%BA%B0%DD%C3D&intIDX=1369&chGROUP=%A7%DE%B3N%A5%E6%ACy